• <ol id="061zy"><blockquote id="061zy"></blockquote></ol>
    1. <acronym id="061zy"></acronym>
    2. 廣州偉伯科技有限公司
      您的位置:首頁 > 新聞中心 > 葡萄糖(GO)檢測試劑盒產品說明書
      新聞中心
      葡萄糖(GO)檢測試劑盒產品說明書
      2020.02.26   點擊555次

      (本中文說明書為翻譯稿,僅供參考,應以英文版為準)

      貨號:3091314 (Sigma-Aldrich : GAGO20)

      儲存溫度:2-8℃

      產品描述:

      酶作為一種分析工具,在食品、生化和制藥工業中得到了廣泛的應用。酶的方法是特異性的,可重復的,靈敏的,快速的,因此,是分析目的的理想方法。由于酶的高特異性和敏感性,定量分析可以在很少或沒有樣品準備的情況下進行1-5。

      本試劑盒用于食品和其它材料中葡萄糖的定量、酶法測定。各種出版物已經報道了在不同的系統和樣本上使用該試劑盒,包括果蠅6-8、牛糞9、培養的小鼠肌肉細胞10、HEPG2細胞11和水生生物12。

      原理:

      葡萄糖(GO)檢測試劑盒原理圖

      • 葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化成葡萄糖酸和過氧化氫。

      • 過氧化氫在過氧化物酶的存在下與鄰二苯胺反應生成有色產物。

      • 氧化的鄰二苯胺與硫酸反應生成更穩定的有色產品。

      • 在540 nm處測得的粉紅色的強度與原始葡萄糖濃度成正比。

      試劑盒組成:

      1、葡萄糖氧化酶/過氧化物酶試劑

      • 將未打開的試劑盒試劑保存在2-8℃。每個膠囊包含500單位的葡萄糖氧化酶(黑曲霉),100單位(purpurogallin units)的過氧化物酶(辣根)和緩沖鹽。

      • 將膠囊內容物倒入琥珀色的瓶子中。

      • 將這些物質溶解在39.2 mL去離子水中。

      • 該溶液在2-8℃最多穩定一個月,在-20℃冷凍至少六個月。

      • 如果出現渾濁,請丟棄。

      2、鄰二苯胺試劑

      • 將未打開的試劑盒試劑保存在2-8℃。盡量減少曝光。預先稱量的小瓶中含有5毫克的鄰二苯胺鹽酸鹽。

      • 用1.0 mL的去離子水重新配制鄰二苯胺小瓶的內容物。

      • 翻轉樣品瓶幾次以溶解。

      • 避免將試劑暴露在光線下。

      • 溶液在2-8℃下穩定3個月。

      3、分析試劑

      • 向裝有39.2 mL葡萄糖氧化酶/過氧化物酶試劑的琥珀瓶中加入0.8 mL鄰二苯胺試劑。

      • 將瓶子倒過來幾次混合。

      • 盡量減少暴露在光線下。

      • 溶液在2-8℃下穩定1個月。

      • 如果出現渾濁或其他顏色,請丟棄。

      4、葡萄糖標準溶液

      • D-葡萄糖,在0.1%的苯甲酸中為1.0 mg/mL。

      • 該標準可追溯到NIST標準,并提供即用型。

      • 在2-8℃穩定至少六個月。

      • 如果出現混濁,請丟棄。

      必需但未提供試劑:

      硫酸,ACS試劑,為18M硫酸試劑。在去離子水中準備6M溶液。

      儀器:

      1、分光光度計或比色計:可在540nm下測定吸光度。

      2、比色皿。

      3、試管,18 mm×150 mm

      4、移液器:能夠準確分配20 μL至2.0 mL的體積。

      5、能保持溫度在37℃的水浴鍋

      注意事項和免責聲明:

      本試劑僅供科研使用,不能用于藥品、家庭以及其他用途。有關危險和安全操作規程的信息,請參閱安全數據表。

      操作步驟:

      樣品制備:

      液體:

      • 用去離子水將樣品稀釋至葡萄糖濃度為20-80μg/mL。

      • 如有必要,對溶液進行過濾或去蛋白處理以使其澄清。

      • 樣品葡萄糖含量較低且顏色較深時,應予以脫色處理。

      • 含碳酸或發酵樣品,須脫氣處理。

      固體:

      • 稱量0.1mg樣品。

      • 用去離子水提取樣品?梢詫⑷芤杭訜(<75℃)以幫助萃取。

      • 用去離子水稀釋提取液品至葡萄糖濃度為20-80μg/mL。

      • 如有必要,對溶液進行過濾或去蛋白處理以使其澄清。

      測定:

      方法1:標準曲線中的葡萄糖濃度

      1、吸取以下溶液到相應的試管中:

      試管水(ml)樣品(ml)葡萄糖標準溶液(ml)
      空白試劑1.00--
      1#   試管0.98-0.02
      2#   試管0.96-0.04
      3#   試管0.94-0.06
      4#   試管0.92-0.08
      測試-1.00-

      2、計時起點,通過向第一個試管中加入2.0 mL的測定試劑開始反應并混合。在向每個后續試管中添加測定試劑之間,要間隔30至60秒。

      3、讓每個試管在37℃下反應30分鐘。通過在每個試管中加入2.0 mL的6M硫酸溶液,以30-60秒的間隔停止反應。小心地將各管徹底混合。

      4、在540 nm處測量每個試管對空白試劑的吸光度。

      方法2:單一標準品中的葡萄糖濃度

      1、吸取以下溶液到相應的試管中:

      試管水(ml)樣品(ml)葡萄糖標準溶液(ml)
      空白試劑1.00--
      1#   試管0.95-0.05
      測試-1.00-

      2、計時起點,通過向第一個試管中加入2.0 mL的測定試劑開始反應并混合。在向每個后續試管中添加測定試劑之間,要間隔30至60秒。

      3、讓每個試管在37℃下反應30分鐘。通過在每個試管中加入2.0 mL的6M硫酸溶液,以30-60秒的間隔停止反應。小心地將各管徹底混合。

      4、在540 nm處測量每個試管對空白試劑的吸光度。

      結果:

      計算方法1:

      對于標準品,繪制540 nm處的吸光度(y軸)與葡萄糖的毫克含量(x軸)標準曲線。如果標準曲線不是線性的,則結果將不準確。重復測定。

      對于測試,從標準曲線確定葡萄糖毫克數。

      將上面確定的毫克葡萄糖乘以樣品制備中的稀釋倍數。

      計算方法2:

      葡萄糖(GO)檢測試劑盒測定結果計算公式

      將上面確定的毫克葡萄糖乘以樣品制備中制備的稀釋倍數。

      參考文獻:

      1、Bergmeyer, H.U. and Bernt , E., Methods of Enzymatic Analysis (H.U. Bergmeyer, ed.). Academic Press (New York, NY), 2nd ed., pp. 1205-1212 (1974).

      2、Official Methods of Analysis, 16th Edition. AOAC International, Sections 32.2.05 and 44.7.12 (1995).

      3、Raabo, E. and Terkildsen, T.C., Scand. J. Clin. and Lab. Invest., 12(4), 402-407 (1960).

      4、Southgate, D.A.T., Determination of Food Carbohydrates. Applied Science Publishers, Ltd. (London, 1976).

      5、Washko, M.E. and Rice, E.W., Clin. Chem., 7(5), 542-545 (1961).

      6、Wen, Z. et al., Appl. Biochem., Biotechnol., Spring; 121-124, 93-104 (2005).

      7、Huang, J.-H. and Douglas, A.E., Biol. Lett., 11(9), 20150469 (2015).

      8、Unckless, R.L. et al., G3 (Bethesda), 5(3), 417-425 (2015).

      9、Tennessen, J.M. et al., Methods, 68(1), 105-115 (2014).

      10、Hien, T.T. et al., J. Biol. Chem., 291(7), 3552-3568 (2016).

      11、Whitehead, T.D. et al., J. Nucl. Med., 54(10), 1812-1819 (2013).

      12、Hsiao, C.J. et al., Dis. Aquat. Organ., 119(3), 199-206 (2016).

      廣州偉伯科技有限公司 版權所有 CopyRight ©2006-2020, All Rights Reserved
      工信部備案號:粵ICP備08114744號   Page Run Time: 0.0023
      自拍国语对白在线视频.免费香蕉依人在线视频.男人和女人香蕉网线看,亚洲欧美人成综合在线